培养基灭菌方法?
培养基的灭菌方法
1、高压蒸汽灭菌:
高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。
培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。
灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。
消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则有机物质特别是维生素类物质就会在高温下分解,失去营养作用,也会使培养基变质、变色,甚至难以凝固。
将蒸馏水或自来水装在三角瓶中,装水量一般不超过瓶的2/3,用牛皮纸或硫酸纸包扎封口,然后放入高压锅中灭菌后即为无菌水。
灭菌后的培养基可放到培养室中预培养3d,若无污染现象,则证明灭菌是彻底的,可以使用。
暂时不用的培养基最好置于10℃下保存。
含IAA或GA3的培养基应在1周内用完,其他培养基最多也不要超过1个月。
2、过滤灭菌:
一些植物生长调节剂及有机物,如IAA、GA3、ZT、CM等,遇热容易分解,不能与培养基一起进行高温灭菌,而要使用细菌过滤器滤去其中的杂菌。
细菌过滤器与滤膜(孔径0.45微米)使用之前要先进行高压灭菌。
过滤后的溶液要立即加入培养基中,若为液体培养基,可在培养基冷却至30℃时加入;若为固体培养基,必须在培养基凝固之前(50-60℃)加入,振荡使溶液与其他成分混合均匀。
扩展资料:
培养基有哪些种类
培养基按其组成物质的纯度、状态、用途可分为三大类型。
按纯度合成培养基是指原料其化学成分明确、稳定的培养基。
适合于研究菌种基本代谢和过程的物质变化规律,但是培养基营养单一,价格较高,不适合用于大规模工业生产。
天然培养基这一类培养基采用天然的原料,所以其原料来源丰富(大多为农副产品)、价格低廉、适于工业。
然而原料质量等方面不加控制会影响生产的稳定性。
按状态固体培养基适合于菌种和孢子的培养和保存,也广泛应用于有子实体的真菌类,如香菇、白木耳等的生产。
半固体培养基在配好的液体培养基中加入少量的琼脂,一般用量为0.5%~0.8%,主要用于微生物的鉴定。
液体培养基80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的营养成分,是发酵工业大规模使用的培养基。
按用途培养基按其用途可分为孢子(斜面)培养基、种子培养基和发酵培养基三种。
培养基灭菌方法?
培养基的灭菌方法
1、高压蒸汽灭菌:
高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。
培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。
灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。
消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则有机物质特别是维生素类物质就会在高温下分解,失去营养作用,也会使培养基变质、变色,甚至难以凝固。
将蒸馏水或自来水装在三角瓶中,装水量一般不超过瓶的2/3,用牛皮纸或硫酸纸包扎封口,然后放入高压锅中灭菌后即为无菌水。
灭菌后的培养基可放到培养室中预培养3d,若无污染现象,则证明灭菌是彻底的,可以使用。
暂时不用的培养基最好置于10℃下保存。
含IAA或GA3的培养基应在1周内用完,其他培养基最多也不要超过1个月。
2、过滤灭菌:
一些植物生长调节剂及有机物,如IAA、GA3、ZT、CM等,遇热容易分解,不能与培养基一起进行高温灭菌,而要使用细菌过滤器滤去其中的杂菌。
细菌过滤器与滤膜(孔径0.45微米)使用之前要先进行高压灭菌。
过滤后的溶液要立即加入培养基中,若为液体培养基,可在培养基冷却至30℃时加入;若为固体培养基,必须在培养基凝固之前(50-60℃)加入,振荡使溶液与其他成分混合均匀。
扩展资料:
培养基有哪些种类
培养基按其组成物质的纯度、状态、用途可分为三大类型。
按纯度合成培养基是指原料其化学成分明确、稳定的培养基。
适合于研究菌种基本代谢和过程的物质变化规律,但是培养基营养单一,价格较高,不适合用于大规模工业生产。
天然培养基这一类培养基采用天然的原料,所以其原料来源丰富(大多为农副产品)、价格低廉、适于工业。
然而原料质量等方面不加控制会影响生产的稳定性。
按状态固体培养基适合于菌种和孢子的培养和保存,也广泛应用于有子实体的真菌类,如香菇、白木耳等的生产。
半固体培养基在配好的液体培养基中加入少量的琼脂,一般用量为0.5%~0.8%,主要用于微生物的鉴定。
液体培养基80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的营养成分,是发酵工业大规模使用的培养基。
按用途培养基按其用途可分为孢子(斜面)培养基、种子培养基和发酵培养基三种。
实验室一般采用什么灭菌方法,不同培养基的灭菌条件?
金属器具先用酒精擦拭,之后干热灭菌,使用时需烧灼;塑料可用高温灭菌;有机溶剂需用过滤灭菌;双手及操作台面可用酒精擦拭,台面及操作室还需紫外灭菌;培养基需用湿热高温灭菌,至于对待不同的培养基灭菌条件都有所不同,如植物组培使用的培养基与微生物中使用的就不同,具体的应查阅相关文献.
培养基灭菌时间?
培养基用高压蒸汽灭菌法,灭菌15到30分钟即可。
为什么培养基不能用干热灭菌法?
因为培养基中一般都含有水无机盐,碳源氮源和生长因子,温度过高会破坏培养基中的营养成分。
培养基含有水,采用干热灭菌法时会将水蒸干,干热温度为170会将其中的营养物改变,如糖糊化发黑生成有毒的物质。
以至于无法培养微生物。
采用高压蒸汽灭菌能保持培养基中的水分。
在含水的时微生物容易被杀灭。